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超微粉碎技術(shù)提高愈風(fēng)寧心片溶出度的研究
發(fā)布時(shí)間:2018-12-07 瀏覽量:2611

超微粉碎技術(shù)提高愈風(fēng)寧心片溶出度的研究

蘇瑞強(qiáng),林峰,李杰,  莊建民

山東魯南制藥廠,山東 臨沂276003

愈風(fēng)寧心片為葛根藥材乙醇提取物與葛根細(xì)粉經(jīng)混合制粒、壓片而成,《中國(guó)藥典》2000年版一部

以葛根素作為指標(biāo)成份控制;本品具有解頸止痛、增加腦及冠狀動(dòng)脈血流量的作用。用于高血壓頭暈,

頭痛,頸項(xiàng)疼痛,冠心病,心絞痛,神經(jīng)性頭痛, 早期突發(fā)性耳聾等病癥[1]。 其主要有效成份為葛根

素,據(jù)報(bào)道其口服給藥在動(dòng)物體內(nèi)生物利用度較低,有關(guān)人體內(nèi)生物利用度的研究尚未見(jiàn)報(bào)道[2,3]。鑒

于固體口服制劑的生物利用度與藥物溶出度密切相關(guān), 我們研究了葛根細(xì)粉的粉碎工藝技術(shù)與愈風(fēng)寧

心片溶出度的關(guān)系,現(xiàn)報(bào)道如下。

1、儀器與試藥

BJ-2型崩解儀(天津市國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備公司);RCZ-8A型智能藥物溶出儀(天津大學(xué)精密儀器廠); LC-10A 高效液相色譜儀(LC-10AD 泵,SPD-10AUV 檢測(cè)器,C-R7A 數(shù)據(jù)處理機(jī)),Shim-Pack-ODS

6.0×150mm)柱;JL9200 激光粒度儀(濟(jì)南微納儀器有限公司);葛根素對(duì)照品 (中國(guó)藥品生物制

品檢定所);葛根藥材(購(gòu)于陜西鎮(zhèn)平縣醫(yī)藥公司),經(jīng)鑒定為豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi

的干燥根;SF-60 型普通粉碎機(jī)(常熟中藥制藥機(jī)械廠);試驗(yàn)型微粉機(jī)甲醇、乙醇為分析純。

2、實(shí)驗(yàn)方法

2.1樣品制備

2.1.1葛根浸膏提取

取葛根粗粉850g,用85% 乙醇加熱回流提取三次,第一次加8倍量提取4小時(shí),第二、三次各加

6倍量提取3小時(shí),放出濾過(guò),合并濾液,回收乙醇,減壓濃縮至相對(duì)密度為1.3270℃)放出即得。

2.1.2葛根細(xì)粉的制備及粒度分布檢查

細(xì)粉A:用普通粉碎機(jī)(羅底100目)將葛根片粉碎后再過(guò)200目細(xì)篩即得。

細(xì)粉B:每次取葛根片400g投進(jìn)三清易辰微粉機(jī)粉碎13分鐘(此時(shí)間經(jīng)實(shí)驗(yàn)以100%過(guò)200目篩確定)放出即得。

粒度分布檢查:利用激光粒度儀對(duì)細(xì)粉A、細(xì)粉B的粒度(0.690µm)分布情況進(jìn)行了檢測(cè)。

2.1.3片劑制備(素片)

A:取葛根(850g)提取浸膏與細(xì)粉A 150g混合干燥,粉碎后過(guò)100目篩加適量淀粉、羧甲基

纖維素混勻,用70% 乙醇潤(rùn)濕制粒、干燥整粒,加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片(片重220mg)。

B:取葛根(850g)提取浸膏與細(xì)粉B 150g 混合干燥,粉碎后過(guò)100目篩加適量淀粉、羧甲基

纖維素混勻,用70% 乙醇潤(rùn)濕制粒、干燥整粒,加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片(片重220mg)。

2.2溶出度研究

2.2.1色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相:甲醇-水(2575);流速1ml·min-1;柱溫為室溫;

檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。

2.2.2崩解度測(cè)定

按《中國(guó)藥典》2000年版一部片劑通則項(xiàng)下崩解時(shí)限的檢驗(yàn)方法,取三批片A樣測(cè)得的崩解時(shí)限

分別為42±3min,44±2min,45±2min;取三批片B樣測(cè)得的崩解時(shí)限分別為43±3min,45±2min,

45±7min;均符合其規(guī)定。

2.2.3線性范圍

精密稱取葛根素對(duì)照品10mg,置25ml量瓶中,加30%乙醇稀釋至刻度,搖勻;分別精密量取0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,置10ml 量瓶中,用30%乙醇稀釋至刻度,在上述色譜條件下測(cè)定葛根素

色譜峰面積。以濃度C為橫坐標(biāo),峰面積A為縱坐標(biāo),按最小二乘法進(jìn)行線性回歸得回歸方程C=7.92

×10-2A – 1.86×10-1,r=0.9992,葛根素含量在20200µg·ml-1線性關(guān)系良好。

2.2.4樣品中葛根素含量測(cè)定

取愈風(fēng)寧心片10片(素片),精密稱定,研細(xì),取細(xì)粉約50mg,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精

密加入30%乙醇50ml,閉塞稱定重量,超聲處理20min,稱定重量,用30%乙醇補(bǔ)足減失的重量,搖

勻,濾過(guò),取續(xù)濾液作供試品溶液;取供試品溶液10µl,進(jìn)樣測(cè)定,得片A的含量為13.62mg/(n=3),

B的含量為17.43mg/片(n=3)。

2.2.5溶出度測(cè)定

按照《中國(guó)藥典》2000年版二部溶出度測(cè)定方法中的第一法測(cè)定,以水為釋放介質(zhì),每只轉(zhuǎn)籃中

放置3片,測(cè)得的溶出量為平均溶出量;轉(zhuǎn)速為100r.min-1,平行對(duì)片A、片B各測(cè)6組。

3、結(jié)果

3.1細(xì)粉A、細(xì)粉B的粒度分布測(cè)試結(jié)果

1  細(xì)粉A的粒度分布情況

   序號(hào)   粒度(um)  體積%    累積%    序號(hào)   粒度(um)   體積%    累積%                                                         

1     0.6-1.2      0.000      0.00      15     27-30        2.302      14.59

2     1.2-3.0      0.000      0.00      16     30-34        2.532      17.12

3     3.0-4.5      0.006      0.01      17     34-38        3.276      20.40

4     4.5-6.2      0.372      0.38      18     38-42        3.757      24.16

5     6.2-7.6      0.534      0.91      19     42-46        4.102      28.26

6     7.6-9.2      0.802      1.71      20     46-50        4.306      32.57

7     9.2-11.4     0.871      2.58      21     50-54        4.402      36.97

8    11.4-12.8     1.089      3.67      22     54-58        4.688      41.66

9    12.8-14.2     1.102      4.77      23     58-62        10.372     52.03

   10    14.2-15.8     1.123      5.89      24     62-66        14.249     66.28

   11    15.8-17       1.151     7.04       25     66-70        17.901     84.18

   12    17-20        1.301     8.34       26     70-75        15.618     99.80

   13    20-24        1.682     10.02      27     75-80        0.201      100.00

   14    24-27        2.266     12.29      28     80-90        0.000      100.00           

2  細(xì)粉B的粒度分布情況

  序 號(hào)   粒度(um)  體積%    累積%      序 號(hào)     粒度(um)  體積%    累積%                                                         

1     0.6-0.9      0.000     0.00         15       14-17         5.167    32.32

2     0.9-1.3      1.824     1.82         16       17-20        6.079     38.40

3     1.3-2.0      3.445     5.27         17       20-24        6.890     45.29

4     2.0-2.5      1.216     6.48         18       24-28        7.599     52.89

5     2.5-3.2      0.810     7.29         19       28-32        7.801     60.69

6     3.2-4.0      1.014     8.31         20       32-36        7.497     68.19

7     4.0-5.2      1.419     9.73         21       36-40        7.36      75.58

8     5.2-6.0      0.912     10.64        22       40-45        7.194     82.78

9     6.0-6.8      1.216     11.85        23       45-52        6.687     89.46

10    6.8-7.7      1.722     13.58        24       52-60        5.268     94.73

11    7.7-8.7      2.330     15.91        25       60-70        3.445     98.18

12    8.7-9.9      3.040     18.95        26       70-75        1.732     99.91

13    9.9-12      3.749     22.70        27       75-80        0.089     100.00

14    12-14       4.458     27.15        28       80-90       0.000      100.00                                               

注:200目篩孔內(nèi)徑為75μm,300目篩孔內(nèi)徑為47μm,5μm相當(dāng)于2000目。

3.2溶出度測(cè)定結(jié)果

3  愈風(fēng)寧心片累積溶出率(%)

       時(shí)間/min      A          B       時(shí)間/min      A            B

        10        3.2±1.6    6.5±7.2    40       42.9±1.5   71.3±1.4

        15        7.8±8.1   16.2±1.4    45       56.2±2.3    82.4±1.8 

        20       11.5±5.3   26.7±2.1    50       62.1±5.6    91.6±4.1

        25       17.8±4.3   34.2±1.7    55       66.8±7.5    93.2±5.8 

        30       24.6±6.1   45.6±8.2    60       69.6±6.4    96.8±5.2

        35       31.4±2.6   56.4±5.2           

注:n=6

3.3A、片B溶出度比較

4  愈風(fēng)寧心片溶出度比較

  品                  T50/min             P

A                    43.2±6.1          <0.01

                B                    32.5±3.5

3.4同種粉碎工藝技術(shù)制備不同批次制劑的溶出度穩(wěn)定性比較

愈風(fēng)寧心片不同批次間溶出度比較

樣  品    批   號(hào)            T50/min            P

                       010426            43.5±5.6

               A       010427            48.6±2.6         <0.05

                       010428            58.5±6.2

                       010424            32.8±1.7

                B      010422            33.2±3.4         >0.05

010421            33.0±1.2

4、討論

4.1植物細(xì)胞中的有效成份需經(jīng)過(guò)浸潤(rùn)、溶脹、滲透和擴(kuò)散方能溶出,超微粉碎技術(shù)一方面可使生

藥細(xì)粉的表面積大大增加,提高藥物的溶出速度,從而有利于藥物的吸收[4];另一方面超微粉碎技術(shù)

可使植物藥細(xì)胞破壁率達(dá)90%,從而使植物細(xì)胞中的有效成份直接暴露出來(lái)并進(jìn)入體液,提高其生物

利用度[5],這是本實(shí)驗(yàn)中超微粉碎技術(shù)制得的制劑溶出度遠(yuǎn)大于普通粉碎技術(shù)制得的制劑的原因所在。

有關(guān)本實(shí)驗(yàn)制劑的生物利用度有待進(jìn)一步研究。

4.2固體制劑的溶出度與原輔料的物化性質(zhì)、制劑工藝等因素密切相關(guān),不同廠家因采用不同的原

輔料和生產(chǎn)方法,必然造成溶出度有較大差異,建議應(yīng)通過(guò)研究對(duì)愈風(fēng)寧心片溶出度作出統(tǒng)一的評(píng)價(jià)

標(biāo)準(zhǔn)及控制標(biāo)準(zhǔn),以此保證其臨床療效。

4.3采用普通粉碎技術(shù)獲得的愈風(fēng)寧心片不同批次間溶出度存在較大差異,原因可能與其獲得的藥

粉不能全部位過(guò)篩有關(guān),葛根纖維性較強(qiáng),利用普通粉碎機(jī)不能加工至全部位達(dá)到微米中藥(175µm)

的細(xì)度,不僅每次粉碎所得的細(xì)粉在粒度上差異大, 而且在所含組織或部位上亦有差異,進(jìn)而所含有

效成份也就不同;超微粉碎經(jīng)過(guò)試驗(yàn)確定出全過(guò)篩(200目)粉碎時(shí)間是以藥材全部入

藥為前提的,所以各批次之間差異很小,由此看來(lái), 利用超微粉碎技術(shù)獲得的生藥粉制劑,更符合中

醫(yī)處方用藥的要求。

4.4轉(zhuǎn)籃法測(cè)定溶出度通常為每籃放1片,考慮到本實(shí)驗(yàn)含量測(cè)定方法的線性范圍及片劑的葛根素

含量,改為每籃放3片。

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