發(fā)布時(shí)間：2018-12-07
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超微粉碎技術(shù)提高愈風(fēng)寧心片溶出度的研究
蘇瑞強(qiáng)，林峰，李杰, 莊建民
山東魯南制藥廠，山東 臨沂276003
愈風(fēng)寧心片為葛根藥材乙醇提取物與葛根細(xì)粉經(jīng)混合制粒、壓片而成，《中國(guó)藥典》2000年版一部
以葛根素作為指標(biāo)成份控制；本品具有解頸止痛、增加腦及冠狀動(dòng)脈血流量的作用。用于高血壓頭暈，
頭痛，頸項(xiàng)疼痛，冠心病，心絞痛，神經(jīng)性頭痛， 早期突發(fā)性耳聾等病癥[1]。 其主要有效成份為葛根
素，據(jù)報(bào)道其口服給藥在動(dòng)物體內(nèi)生物利用度較低，有關(guān)人體內(nèi)生物利用度的研究尚未見(jiàn)報(bào)道[2，3]。鑒
于固體口服制劑的生物利用度與藥物溶出度密切相關(guān)， 我們研究了葛根細(xì)粉的粉碎工藝技術(shù)與愈風(fēng)寧
心片溶出度的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。
1、儀器與試藥
BJ-2型崩解儀（天津市國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備公司）；RCZ-8A型智能藥物溶出儀（天津大學(xué)精密儀器廠）； LC-10A 高效液相色譜儀（LC-10AD 泵，SPD-10AUV 檢測(cè)器，C-R7A 數(shù)據(jù)處理機(jī)），Shim-Pack-ODS
（6.0×150mm）柱；JL9200 激光粒度儀（濟(jì)南微納儀器有限公司）；葛根素對(duì)照品 （中國(guó)藥品生物制
品檢定所）；葛根藥材（購(gòu)于陜西鎮(zhèn)平縣醫(yī)藥公司），經(jīng)鑒定為豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi
的干燥根；SF-60 型普通粉碎機(jī)（常熟中藥制藥機(jī)械廠）；試驗(yàn)型微粉機(jī)甲醇、乙醇為分析純。
2、實(shí)驗(yàn)方法
2.1樣品制備
2.1.1葛根浸膏提取
取葛根粗粉850g，用85% 乙醇加熱回流提取三次，第一次加8倍量提取4小時(shí)，第二、三次各加
6倍量提取3小時(shí)，放出濾過(guò)，合并濾液，回收乙醇，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32（70℃）放出即得。
2.1.2葛根細(xì)粉的制備及粒度分布檢查
細(xì)粉A：用普通粉碎機(jī)（羅底100目）將葛根片粉碎后再過(guò)200目細(xì)篩即得。
細(xì)粉B：每次取葛根片400g投進(jìn)三清易辰微粉機(jī)粉碎13分鐘（此時(shí)間經(jīng)實(shí)驗(yàn)以100%過(guò)200目篩確定）放出即得。
粒度分布檢查：利用激光粒度儀對(duì)細(xì)粉A、細(xì)粉B的粒度（0.6～90µm）分布情況進(jìn)行了檢測(cè)。
2.1.3片劑制備（素片）
片A：取葛根（850g）提取浸膏與細(xì)粉A 150g混合干燥，粉碎后過(guò)100目篩加適量淀粉、羧甲基
纖維素混勻，用70% 乙醇潤(rùn)濕制粒、干燥整粒，加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片（片重220mg）。
片B：取葛根（850g）提取浸膏與細(xì)粉B 150g 混合干燥，粉碎后過(guò)100目篩加適量淀粉、羧甲基
纖維素混勻，用70% 乙醇潤(rùn)濕制粒、干燥整粒，加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片（片重220mg）。
2.2溶出度研究
2.2.1色譜條件
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相：甲醇-水（25∶75）；流速1ml·min-1；柱溫為室溫；
檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。
2.2.2崩解度測(cè)定
按《中國(guó)藥典》2000年版一部片劑通則項(xiàng)下崩解時(shí)限的檢驗(yàn)方法，取三批片A樣測(cè)得的崩解時(shí)限
分別為42±3min，44±2min，45±2min；取三批片B樣測(cè)得的崩解時(shí)限分別為43±3min，45±2min，
45±7min；均符合其規(guī)定。
2.2.3線性范圍
精密稱取葛根素對(duì)照品10mg，置25ml量瓶中，加30%乙醇稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置10ml 量瓶中，用30%乙醇稀釋至刻度，在上述色譜條件下測(cè)定葛根素
色譜峰面積。以濃度C為橫坐標(biāo),峰面積A為縱坐標(biāo)，按最小二乘法進(jìn)行線性回歸, 得回歸方程C=7.92
×10-2A – 1.86×10-1,r=0.9992，葛根素含量在20～200µg·ml-1線性關(guān)系良好。
2.2.4樣品中葛根素含量測(cè)定
取愈風(fēng)寧心片10片（素片)，精密稱定，研細(xì)，取細(xì)粉約50mg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精
密加入30%乙醇50ml，閉塞稱定重量，超聲處理20min，稱定重量，用30%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖
勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作供試品溶液；取供試品溶液10µl，進(jìn)樣測(cè)定，得片A的含量為13.62mg/片(n=3)，
片B的含量為17.43mg/片（n=3）。
2.2.5溶出度測(cè)定
按照《中國(guó)藥典》2000年版二部溶出度測(cè)定方法中的第一法測(cè)定，以水為釋放介質(zhì)，每只轉(zhuǎn)籃中
放置3片，測(cè)得的溶出量為平均溶出量；轉(zhuǎn)速為100r.min-1，平行對(duì)片A、片B各測(cè)6組。
3、結(jié)果
3.1細(xì)粉A、細(xì)粉B的粒度分布測(cè)試結(jié)果
表1 細(xì)粉A的粒度分布情況
序號(hào) 粒度（um） 體積% 累積% 序號(hào) 粒度（um） 體積% 累積%
1 0.6-1.2 0.000 0.00 15 27-30 2.302 14.59
2 1.2-3.0 0.000 0.00 16 30-34 2.532 17.12
3 3.0-4.5 0.006 0.01 17 34-38 3.276 20.40
4 4.5-6.2 0.372 0.38 18 38-42 3.757 24.16
5 6.2-7.6 0.534 0.91 19 42-46 4.102 28.26
6 7.6-9.2 0.802 1.71 20 46-50 4.306 32.57
7 9.2-11.4 0.871 2.58 21 50-54 4.402 36.97
8 11.4-12.8 1.089 3.67 22 54-58 4.688 41.66
9 12.8-14.2 1.102 4.77 23 58-62 10.372 52.03
10 14.2-15.8 1.123 5.89 24 62-66 14.249 66.28
11 15.8-17 1.151 7.04 25 66-70 17.901 84.18
12 17-20 1.301 8.34 26 70-75 15.618 99.80
13 20-24 1.682 10.02 27 75-80 0.201 100.00
14 24-27 2.266 12.29 28 80-90 0.000 100.00
表2 細(xì)粉B的粒度分布情況
序 號(hào) 粒度（um） 體積% 累積% 序 號(hào) 粒度（um） 體積% 累積%
1 0.6-0.9 0.000 0.00 15 14-17 5.167 32.32
2 0.9-1.3 1.824 1.82 16 17-20 6.079 38.40
3 1.3-2.0 3.445 5.27 17 20-24 6.890 45.29
4 2.0-2.5 1.216 6.48 18 24-28 7.599 52.89
5 2.5-3.2 0.810 7.29 19 28-32 7.801 60.69
6 3.2-4.0 1.014 8.31 20 32-36 7.497 68.19
7 4.0-5.2 1.419 9.73 21 36-40 7.36 75.58
8 5.2-6.0 0.912 10.64 22 40-45 7.194 82.78
9 6.0-6.8 1.216 11.85 23 45-52 6.687 89.46
10 6.8-7.7 1.722 13.58 24 52-60 5.268 94.73
11 7.7-8.7 2.330 15.91 25 60-70 3.445 98.18
12 8.7-9.9 3.040 18.95 26 70-75 1.732 99.91
13 9.9-12 3.749 22.70 27 75-80 0.089 100.00
14 12-14 4.458 27.15 28 80-90 0.000 100.00
注：200目篩孔內(nèi)徑為75μm，300目篩孔內(nèi)徑為47μm，5μm相當(dāng)于2000目。
3.2溶出度測(cè)定結(jié)果
表3 愈風(fēng)寧心片累積溶出率(%)
時(shí)間/min A B 時(shí)間/min A B
10 3.2±1.6 6.5±7.2 40 42.9±1.5 71.3±1.4
15 7.8±8.1 16.2±1.4 45 56.2±2.3 82.4±1.8
20 11.5±5.3 26.7±2.1 50 62.1±5.6 91.6±4.1
25 17.8±4.3 34.2±1.7 55 66.8±7.5 93.2±5.8
30 24.6±6.1 45.6±8.2 60 69.6±6.4 96.8±5.2
35 31.4±2.6 56.4±5.2
注：n=6
3.3片A、片B溶出度比較
表4 愈風(fēng)寧心片溶出度比較
樣 品 T50/min P
A 43.2±6.1 <0.01
B 32.5±3.5
3.4同種粉碎工藝技術(shù)制備不同批次制劑的溶出度穩(wěn)定性比較
表5 愈風(fēng)寧心片不同批次間溶出度比較
樣 品 批 號(hào) T50/min P
010426 43.5±5.6
A 010427 48.6±2.6 <0.05
010428 58.5±6.2
010424 32.8±1.7
B 010422 33.2±3.4 >0.05
010421 33.0±1.2
4、討論
4.1植物細(xì)胞中的有效成份需經(jīng)過(guò)浸潤(rùn)、溶脹、滲透和擴(kuò)散方能溶出，超微粉碎技術(shù)一方面可使生
藥細(xì)粉的表面積大大增加，提高藥物的溶出速度，從而有利于藥物的吸收[4]；另一方面超微粉碎技術(shù)
可使植物藥細(xì)胞破壁率達(dá)90%，從而使植物細(xì)胞中的有效成份直接暴露出來(lái)并進(jìn)入體液，提高其生物
利用度[5]，這是本實(shí)驗(yàn)中超微粉碎技術(shù)制得的制劑溶出度遠(yuǎn)大于普通粉碎技術(shù)制得的制劑的原因所在。
有關(guān)本實(shí)驗(yàn)制劑的生物利用度有待進(jìn)一步研究。
4.2固體制劑的溶出度與原輔料的物化性質(zhì)、制劑工藝等因素密切相關(guān)，不同廠家因采用不同的原
輔料和生產(chǎn)方法，必然造成溶出度有較大差異，建議應(yīng)通過(guò)研究對(duì)愈風(fēng)寧心片溶出度作出統(tǒng)一的評(píng)價(jià)
標(biāo)準(zhǔn)及控制標(biāo)準(zhǔn)，以此保證其臨床療效。
4.3采用普通粉碎技術(shù)獲得的愈風(fēng)寧心片不同批次間溶出度存在較大差異，原因可能與其獲得的藥
粉不能全部位過(guò)篩有關(guān)，葛根纖維性較強(qiáng)，利用普通粉碎機(jī)不能加工至全部位達(dá)到微米中藥(1～75µm)
的細(xì)度，不僅每次粉碎所得的細(xì)粉在粒度上差異大， 而且在所含組織或部位上亦有差異，進(jìn)而所含有
效成份也就不同；超微粉碎經(jīng)過(guò)試驗(yàn)確定出全過(guò)篩（200目）粉碎時(shí)間是以藥材全部入
藥為前提的，所以各批次之間差異很小，由此看來(lái)， 利用超微粉碎技術(shù)獲得的生藥粉制劑，更符合中
醫(yī)處方用藥的要求。
4.4轉(zhuǎn)籃法測(cè)定溶出度通常為每籃放1片，考慮到本實(shí)驗(yàn)含量測(cè)定方法的線性范圍及片劑的葛根素
含量，改為每籃放3片。