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酒制及超微粉碎對(duì)當(dāng)歸散中黃芩甙溶出效果的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-12-07 瀏覽量:2591

酒制及超微粉碎對(duì)當(dāng)歸散中黃芩甙溶出效果的影響

王愛(ài)武1  耿軍1魏巍2

(1、 山東省立醫(yī)院,山東 濟(jì)南2500212、山東中醫(yī)藥大學(xué),山東 濟(jì)南250014

[摘要]目的:比較酒制及超微粉碎對(duì)當(dāng)歸散中黃芩甙溶出量的影響。方法:高壓液相色譜法。色譜柱為ODS-C18柱,流動(dòng)相為甲醇-水冰醋酸(47530.1),檢測(cè)波長(zhǎng)280nm,流速為0.8ml˙min-1,柱溫為室溫。結(jié)果:酒制對(duì)當(dāng)歸散中黃芩甙溶出幾乎無(wú)影響,超微粉碎可增加黃甙的溶出。結(jié)論:對(duì)當(dāng)歸散中黃芩溶出量而言,酒制意義水大,超微粉碎有重要意義。

[關(guān)鍵詞]酒制;當(dāng)歸散;黃芩甙

[中圖類號(hào)]R282.710.2     [文獻(xiàn)識(shí)碼]B  [文章編號(hào)]0257-358X200104-0237-02

當(dāng)歸散源于《金匱要略》,有當(dāng)歸、川芎、黃芩、白芍、白術(shù)組成,全方具養(yǎng)血健脾、清熱安胎之功,為中醫(yī)婦科常用方劑。原方系生飲片制散,用酒送服。經(jīng)歷代演變,方中除白術(shù)外,其余四藥均衍化為酒制品。曾有酒制對(duì)復(fù)方中阿魏酸、芍藥甙等成分溶出效果比較的報(bào)道[1],未見(jiàn)有對(duì)黃芩甙溶出量的研究。鑒于黃芩是方中清熱安胎的主要藥物,本文就酒制對(duì)黃芩甙的溶出量進(jìn)行了比較,旨在全面衡量酒制的意義。另?yè)?jù)報(bào)道,超微粉碎技術(shù)在完善中藥炮制技術(shù)、改善中藥固體制劑的品質(zhì)方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和廣闊的應(yīng)用前景[2],本文引入這一技術(shù),研究其對(duì)當(dāng)歸散中黃芩甙溶出的影響,從另一方面探討當(dāng)歸散炮制及制劑的意義。

1儀器與材料

儀器:Water 2690型高效液相色譜儀及996型二極管陣列檢測(cè)器,SQW-6型超微粉碎機(jī),SB 2200型超聲波發(fā)生器(上海必能信超聲有限公司生產(chǎn)),電子分析天平MET-TIER 240(瑞士生產(chǎn))。

試藥與試劑:生當(dāng)歸散及酒制當(dāng)歸散由本院中藥制劑室提供。超細(xì)生當(dāng)歸散由山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所采用超微粉碎技術(shù)制成。黃芩甙對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品鑒定所提供。所用試劑,甲醇為色譜純,水為生重蒸餾水,冰醋酸及乙醇為分析純。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1色譜條件 ODS-C18柱(4.6mm×150mm,5µm),流動(dòng)相為甲醇--冰醋酸(47530.1)檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm,流速為0.8ml˙min-1,柱溫為室溫。

2.2黃芩甙標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備  精密稱取黃芩甙對(duì)照品適量,用甲醇溶解并稀釋成濃度為40µg˙ml-1的溶液,精密吸取對(duì)照品溶液0.63,1.252. 00,2.50,3.75,5.00 ml,加甲醇稀釋至5 ml,搖勻,分別吸取上述各液10µl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,以峰面積Y對(duì)進(jìn)樣濃度X作線性回歸,得回歸方程為Y=30199.45X+5601.98,γ=0.9998,黃芩甙對(duì)照品在進(jìn)樣量0.05~0.40µg范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系。

2.3樣品溶液的制備與測(cè)定   取每種樣品1g,精密稱定,加50%甲醇50ml,超聲提取20min,過(guò)濾。取濾液1ml,加50%甲醇稀釋定容至10ml,用0.45的微孔濾膜過(guò)濾,吸取2ml至自動(dòng)進(jìn)樣閥中進(jìn)樣,按上述色譜條件,記錄黃芩甙的峰面積,按外標(biāo)法計(jì)算含量。

2.4實(shí)驗(yàn)方法的精密度、重現(xiàn)性與穩(wěn)定性   取同一對(duì)照品溶液,平行測(cè)定5次,記錄峰面積,RSD為1.72%,說(shuō)明精密度好。取同一批樣品5份,照樣品測(cè)定法測(cè)定,RSD為1.56%,說(shuō)明重現(xiàn)性好。取同一份樣品液分別在0,2,4,6,8hr進(jìn)樣測(cè)定,峰面積基本不變,RSD為1.6%。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

取同一種樣品5份,照樣品測(cè)定法項(xiàng)目操作,結(jié)果見(jiàn)表1。

表1樣品中黃芩甙含量

mg˙mg-1

黃芩甙含量(χ)                平均值

酒制當(dāng)歸散       25.993    26.401    26.578    27.054    26.695    26.544

生當(dāng)歸散         26.426    26.941    27.436    27.182    26.702    26.937

超細(xì)生當(dāng)歸散     31.472    31.530    32.093    32.125    31.350    31.714

從表1可看出,當(dāng)歸散經(jīng)酒制后,黃芩甙的溶出略有降低,經(jīng)超細(xì)處理后,黃芩甙的溶出明顯增加。

4、討論

當(dāng)歸散原方為生藥散,即用酒沖服,后世將當(dāng)歸、川芎、白芍、黃芩酒制后配方入藥,用水沖服,有研究認(rèn)為,四藥酒制除對(duì)總煎出物略呈助溶作用外,其余5種成分(還原糖、蛋白質(zhì)、揮發(fā)油、阿魏酸、芍藥甙)的溶出均低于生品配方[1]。本研究結(jié)果進(jìn)一步提示,當(dāng)歸散用現(xiàn)行酒制品配方,沒(méi)有顯示對(duì)復(fù)方成分在體內(nèi)的溶出是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,體外試驗(yàn)與體內(nèi)溶出有一定差距。中藥經(jīng)酒制后,其溶液的顏色及味道確實(shí)發(fā)生了變化,對(duì)于酒制品的取舍問(wèn)題,還有待藥理及臨床驗(yàn)證。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)歸散經(jīng)超微粉碎后,黃芩甙的溶出量明顯增加,這與文獻(xiàn)報(bào)道的“細(xì)胞經(jīng)破壁后,細(xì)胞內(nèi)的有效成分充分暴露出來(lái),藥物的釋放速度及釋放量會(huì)大幅度提高”[3]是致的。當(dāng)歸散中含有多種有效成分,其他諸如芍藥甙、阿魏酸等是否與黃芩甙呈現(xiàn)相關(guān)變化,有待進(jìn)一步研究。當(dāng)然,對(duì)當(dāng)歸散進(jìn)行超微粉碎的最終目的是為提高生物利用度和療效,這一點(diǎn)有待藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明。

[參考文獻(xiàn)]

[1]呂文海,董祺.有同用酒方法對(duì)當(dāng)歸散成分溶出效果的比較[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),1997,211):69.

[2]王愛(ài)武,呂文海,耿暉.超微粉碎在中藥生產(chǎn)應(yīng)用概括及展望[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2000,117):669.

[3]郭琪、杜曉敏.中藥細(xì)胞級(jí)微粉碎對(duì)體內(nèi)吸收的影響[J].中成藥,1999,2111):601.

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